上海分光光度計是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、醫(yī)藥等領(lǐng)域的分析儀器,用于測量物質(zhì)對不同波長光的吸收或透射情況,從而進(jìn)行定性或定量分析。為了確保測量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,必須嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)流程進(jìn)行操作。
一、準(zhǔn)備工作
1.儀器準(zhǔn)備:
開機(jī)預(yù)熱:打開分光光度計電源,預(yù)熱至少30分鐘,使儀器達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。
波長校準(zhǔn):使用標(biāo)準(zhǔn)波長濾光片或溶液,按照儀器說明書進(jìn)行波長校準(zhǔn),確保波長準(zhǔn)確性。
基線校準(zhǔn):將空白溶液(通常為去離子水或溶劑)放入比色皿,放入樣品池,進(jìn)行基線校準(zhǔn),消除儀器本身和溶劑的吸光度影響。

2.樣品準(zhǔn)備:
樣品處理:根據(jù)待測物質(zhì)的性質(zhì)和測量要求,對樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理,例如過濾、稀釋、萃取等,確保樣品清澈透明,無懸浮物或沉淀。
比色皿選擇:根據(jù)樣品量和測量波長選擇合適的比色皿,常用的比色皿光程為1cm,材質(zhì)有玻璃和石英兩種,石英比色皿適用于紫外光區(qū)。
比色皿清洗:使用前用去離子水或溶劑清洗比色皿,并用擦鏡紙擦干,避免殘留物影響測量結(jié)果。
二、樣品測量
1.設(shè)置參數(shù):
波長選擇:根據(jù)待測物質(zhì)的最大吸收波長,設(shè)置分光光度計的測量波長。
測量模式:選擇吸光度(Abs)或透射比(T%)模式,通常使用吸光度模式進(jìn)行定量分析。
掃描范圍:如果需要掃描樣品的吸收光譜,可以設(shè)置掃描的起始波長和結(jié)束波長。
2.樣品測量:
空白校正:將空白溶液放入比色皿,放入樣品池,按下“空白校正”鍵,儀器會自動扣除空白溶液的吸光度。
樣品測量:將待測樣品溶液放入比色皿,放入樣品池,按下“測量”鍵,儀器會顯示樣品的吸光度或透射比。
重復(fù)測量:對于同一份樣品,建議重復(fù)測量2-3次,取平均值作為最終結(jié)果,提高測量精度。
三、數(shù)據(jù)處理
1.數(shù)據(jù)記錄:記錄測量得到的吸光度或透射比數(shù)據(jù),以及對應(yīng)的樣品信息、測量條件等。
2.數(shù)據(jù)分析:根據(jù)測量數(shù)據(jù),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或進(jìn)行其他數(shù)據(jù)分析,計算待測物質(zhì)的濃度或含量。
3.結(jié)果報告:撰寫實驗報告,包括實驗?zāi)康?、原理、步驟、結(jié)果、討論等內(nèi)容,并對實驗結(jié)果進(jìn)行分析和解釋。
四、注意事項
比色皿的透光面要保持清潔,避免用手直接觸摸。
樣品溶液的濃度要適中,吸光度值最好在0.2-0.8之間,超出此范圍會影響測量精度。
測量過程中要避免震動和強(qiáng)光直射,以免影響測量結(jié)果。
儀器使用完畢后,要及時關(guān)閉電源,清洗比色皿,并做好儀器的清潔和維護(hù)工作。